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Key words: Cary-Blair medium, Campylobacter jejuni/coli, Diarrheal disease, Milk, Town gas

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昭 和59年12月20日 1271

小 児 下 痢 症;特

にCampylobacter

jejuni/cokiに

つ い て

兵庫県衛生研究所微生物部

島 田

邦 夫

英 高

小 野

一 男

木 村

英 二

(昭和59年4月11日 受 付) (昭和59年9月3日 受 理)

Key words:

Cary-Blair medium, Campylobacter jejuni/coli,

Diarrheal disease, Milk, Town gas

要 旨

最 近,下 痢 症 の 原 因 菌 と し てCampylobacter jejuni/coliが 注 目 され て い る.我 々 はCampykobacterの

培 養 性 状 に つ い て 基 礎 的 な検 討 を 加 え,ニ ワ ト リか らC.jejuniお よ び 小 児 下 痢 患 者 か ら のC.jejuni,

Salmonella,Rota virusの 検 索 を 試 み た.

C.jejuniお よ びC.fetus ss.fetusの 至 適 温 度 は 臨 床 用 チ オ グ リ コ レ ー ト培 地 で,そ れ ぞ れ36.5℃ お よ

び32.5℃ 付 近 に あ り,37℃ 培 養 で は 両 菌 種 と も増 殖 は70時 間 でplateauの 域 に達 す

る.C.jejuniはCary-Blair輸 送 培 地 中 で 生 残 性 が 高 く,糞 便 の 輸 送 培 地 と し て 適 当 で あ った.

小 児 下 痢 患 者 か らのC.jejuni,Sakmonellaお よ びRota virusの 検 出 は,307検 体 中 そ れ ぞ れ76件(検

出 率24.8%),25件(8.1%)お よ び23件(7.6%)で,C.jejuneは 年 間 を 通 じて 検 出 さ れ,Salmonella

は 夏 期 に,Rota virusは 冬 期 に 多 発 し た.ま た 年 齢 か らみ る とC.fejuni,Salmonellaは どの 年 齢 か ら も

検 出 され る が,Rota virusに つ い て は 検 出 した 者 の91.3%ま で が2歳 以 下 の 幼 児 に集 中 した.ま たC. jejuniとSalmonella,C.jejuniとRota virusに よ る混 合 感 染 例 が そ れ ぞ れ5名,2名 認 め ら れ た.ニ ワ ト リか らのC.jejuni検 出 は 直 腸 便45検 体 中18件(検 出 率40.0%),テ バ9検 体 中1件(11.1%)が 陽 性 で あ った が ミ ン チ 肉3検 体 か らは 検 出 で き な か っ た.牛 乳 中 で のC.jejuniの 生 残 性 は 高 く,25℃ や37℃ 保 存 で は 徐 々 に菌 が 減 少 し,4℃ で は1週 間 後 で も菌 の 減 少 を 認 め な か った.こ の こ とは 本 菌 食 中 毒 の 感 染 様 式 を 考 察 す る上 に 注 目す べ き こ と と言 え る. 緒 言 最 近,小 児 の 感 染 性 腸 炎 の 起 因 菌 と し て Campylobacterjejuni/coli(以 下C.jejuni)が 注 目 を 集 め て い る.Campylobacter属 菌 は 従 来 家 畜 の 流 産 や 下 痢 の 原 因 菌 と し て 獣 医 学 領 域 で 知 ら れ て き た が,1973年Butzler1)に よ り ヒ トの 急 性 下 痢 症 の 起 因 菌 と し て 確 認 さ れ て 以 来C.jejuniに よ る 腸 炎 が 世 界 各 国2)∼7)で見 い 出 さ れ"ヒ トに お け る 新 し い 病 気"と し て 知 ら れ て い る.し か し本 菌 の 生 態 学 や 感 染 経 路 な ど は ま だ 不 明 確 な 点 が 多 い の で,我 々 は 菌 性 状 の 基 礎 的 な 検 討 を 加 え,自 然 界 の 保 菌 動 物 の1つ と い わ れ る ニ ワ ト リか らC. jejuniを,ま た 小 児 下 痢 患 者 か らC.jejuniな ら び にSalmonella,Rota virusを 検 出 し た の で 報 告 す る. 材 料 お よ び 方 法 1.供 試 菌 株 菌 性 状 の 基 礎 的 検 討 に は,神 戸 市 環 境 保 健 研 究 所 よ り分 与 さ れ たC.jejuniお よ び 兵 庫 県 立 加 古 川 病 院 で 検 出 さ れ たC.fetus ss.fetusを 使 用 し た. 2.Campylobacterの 発 育 温 度 お よ び 発 育 時 間 Campylobacterの 至 適 発 育 温 度 お よ びplateau に 達 す る 時 間 を 知 る た め 温 度 勾 配 振 盪 培 養 装 置 別刷 請 求 先:(〒652)神 戸 市 兵庫 区荒 田 町2-1-29 兵 庫 県 衛 生研 究 所 微 生物 部 島 田 邦 夫

(2)

(東 洋 科 学 産 業Model-TN3)を 用 い た.温 度 設 定 は 最 低12.0℃ か ら最 高56.2℃ ま で の 範 囲 で 温 度 間 隔1.5℃ の 温 度 勾 配 を 作 り 静 置 の 状 態 で 培 養 を 行 っ た.培 地 は 臨 床 用 チ オ グ リ コ レ ー ト培 地(栄 研)を 用 い,約5×106cells/mlの 菌 液 を 培 地10ml に 対 し0.01ml接 種 し た.菌 の 発 育 は540nmに お け る 吸 光 度 を 測 定 し増 殖 量 と し た. 3.Cary-Blair輸 送 培 地 中 に お け るC.jejuni の 生 残 性 0.2Mリ ン酸 緩 衝 生 理 食 塩 水,pH7.2(PBS) と あ る 健 康 成 人 由 来 の 糞 便 に,そ れ ぞ れC.jejuni を 約108cells/mlお よ び108cells/g接 種 し,よ く撹 拝 後,1綿 棒 量 を そ れ ぞ れCary-Blair輸 送 培 地, pH8.4(Oxoid)に 挿 入 し,8∼72時 間 空 気 中 で 室 温 に お き,経 時 的 に 光 岡 の 方 法8)に 従 っ て 定 量 培 養 を 行 い 生 残 性 を 検 討 し た.平 板 培 地 はSkir-rowの 報 告 し た 選 択 分 離 培 地(Oxoid)を 常 法 に 従 っ て 作 製 し 使 用 し た.培 養 は そ の 平 板 を 嫌 気 性 培 養 用 ジ ャ ー に い れ,85%N2,10%CO2お よ び 5%02を 含 む 混 合 ガ ス(微 好 気 的 環 境)下 に お い て37℃ で72時 間 培 養 後 平 板 上 の コ ロ ニ ー 数 を 算 定 し た. 4.牛 乳 中 に お け るC.jejuniの 生 残 性 市 販 牛 乳 中 にC.jejuni 108cells/mlを 接 種 し, 4℃,25℃,37℃ お よ び42℃ に 保 存 し た 場 合 のC . jejnniの 生 残 性 を 検 討 し た.対 照 と し てPBS中 で の 生 残 を 観 察 し た.分 離 平 板 培 地 はSkirrowの 血 液 寒 天 平 板 を 用 い,培 養 は 上 述 の 微 好 気 的 環 境 下 で 行 っ た. 5.小 児 下 痢 患 者 の 病 因 検 索 1981年4月 か ら1982年3月 ま で の パ ル モ ア 病 院 (P病 院)お よ び 神 戸 市 立 西 市 民 病 院(N病 院)小 児 科 に 下 痢 の た め 来 院 し た 患 者(0歳 ∼15歳)各 々 90名,217名,合 計307名 を 対 象 に 菌 の 検 索 を 行 っ た.同 一 人 で 経 過 観 察 の た め に 複 数 の 糞 便 を 検 索 し た 場 合 も1名 と し た.C.jejuniの 検 索 に は, Skirrowの 血 液 寒 天 平 板 を 用 い,そ れ 以 外 の 既 知 病 原 菌 の 検 索 に はSSB寒 天(日 水),TCBS寒 天 (栄 研)平 板 お よ び マ ン ニ ッ ト・セ レ ナ イ ト増 菌 培 地(Oxoid)を 併 用 し た.検 査 は 綿 棒 でCary-Blair 輸 送 培 地 中 に 採 取 し た 糞 便 に つ い て 行 い,培 養 に あ た っ て は 綿 棒 糞 便 を ブ ル セ ラ ・プ ロ ス(BBL)1 mlに よ く し ぼ り だ し,2白 金 耳 ず つ を 各 種 の 分 離 平 板 培 地 に 塗 抹 し た.Skirrowの 血 液 寒 天 平 板 は 微 好 気 的 環 境 下 に,そ の 他 の 培 地 は 空 気 中37℃ で 培 養 し た.C.jejunioの 同 定 は 前 報9)に 従 っ た.下

痢 患 者 便 か ら のRota virus検 出 はBishopら10)の

方 法 に 従 っ て 実 施 し,同 定 は ロ タ セ ル を 用 い たR-PHA確 認 法11)に よ っ た. 6.都 市 ガ ス 環 境 下 培 養 で のC.jejuniの 検 出 小 児 下 痢 患 者 の 一 部 の233検 体 に つ い て はC. jejuniの 生 育 ガ ス 環 境 と し て,上 述 し た 微 好 気 的 環 境 下 で 培 養 す る 方 法(Standard法)と 神 戸 市 内 に 配 管 さ れ て い る 都 市 ガ ス(6C)を 充 て ん し た ジ ャ ー を 用 い る 培 養 法(Towngas法)を 用 い, C.jejuni検 出 の 比 較 を 行 っ た.都 市 ガ ス の 組 成 は 022%,CO210%,N210%,H246%,CO5%,CH4 22%お よ び そ の 他 の 炭 化 水 素(CmHn)5%で 比 重0.53で あ る. 7.ニ ワ ト リか ら のC.jejuni検 索 感 染 経 路 追 求 の 為 に 神 戸 市 中 央 卸 売 市 場 のK店 よ り入 手 し た ニ ワ ト リの 直 腸 便45件,テ バ9件, ミ ン チ 肉3件 に つ い てSkirrowの 血 液 寒 天 平 板 を 用 い,微 好 気 的 環 境 下 でC.jejuni検 索 を 実 施 し た. 結 果 1.Campylobaoterの 発 育 温 度 お よ び 発 育 時 間 Fig.1に 示 し た よ う にC.jejuniとC.fetus ss. fetusの 発 育 温 度 域 は,そ れ ぞ れ28∼45℃, 22∼40.5℃ で 至 適 温 度 は 各 々36.5℃ お よ び32.5℃ 付 近 に あ っ た.ま たFig.2に 示 す 如 く,37℃ で 培 養 す る と 発 育 は 両 菌 種 と も ほ ぼ70時 間 でplateau の 域 に 達 し た.ま た42℃ で はC.jejuniが48時 間 で

plateauの 域 に 達 し た が,C.fetus ss.fetusは 発 育

を 認 め な か っ た.25℃ で は 逆 にC.fetus ss. fetus は 徐 々 に 発 育 を 示 す がC.jejuniの 発 育 を 認 め な か っ た. 2.Cary-Blair輸 送 培 地 中 に お け るC.jejuni の 生 残 性 C.jejuniを 糞 便 に 接 種 し た 場 合 に は,生 残 菌 数 の 急 激 な 減 少 が あ り,菌 接 種8時 間 後 に4-log以 上 も 減 少 し,28時 間 後 で は も は や 菌 の 検 出 は で き な

(3)

昭 和59年12月20日 1273

Fig. 1 Growth of Campylobacter at different

tem-perature. Bacterial growth was expressed by OD

at 540nm after incubation for 70 hours in a

clinical thioglycolate broth.

Fig. 2 Growth of Campylobacter at various time was shown by OD at 540nm. The incubation was carried out at 25•Ž, 37•Ž and 42t in a clinical thioglycolate broth.

か った.ま

たPBS中

に 懸 濁 した 場 合 は28時 間 後

ま で は生 菌 数 に変 化 が な いが,48時 間 後 に は4-10g

以 上 減 少 し,次 第 に 減 少 傾 向 に あ った.し

か し,

Fig. 3 Survival of Campylobacter jejuni in the sterile Cary-Blair medium. C. jejuni of different preparations was stored at room temperature for various hours. Colony counts were done after incubation at 37•Ž for 72hrs.

Symbols:-ƒ¢- Stool (cells/g), •~ Phos-phate buffer saline (cells/ml),-•œ- Cary-Blair medium inoculated with the stool specimen (cells/swab), ---•›--- Cary-Blair medium inoculated with the PBS specimen (cells/swab).

Fig. 4 Survival of Campylobacter jejuni inoculated into commercial milk stored at 4t (a), 25•Ž (b), 35t (c) and 42•Ž (d). As controls, preparations of C. jejuni inoculated into phosphate buffer saline was stored at 4•Ž (e), 25t (f), 35t (g) and 42•Ž (h).

(4)

Fig. 5 Monthly appearance of diarrheal pathogens and patients from pediatric wards of two hospitals.

(1) N.Hospital (2) P.Hospital

Cary-Blair輸

送 培 地 に 接 種 した 場 合 は70時 間 経

過 して も生 菌 数 の 減 少 を 認 め な か った(Fig3).

3. 牛 乳 中 に お け るC.jejuniの

生 残 性

C.jejuniを

接 種 した 牛 乳 お よ びPBSを4℃

保 存 した 場 合 は,菌 接 種 後7日 間 経 過 して も菌 の

減 少 は認 め られ な か った.温 度 を そ れ ぞ れ25℃,

37℃ お よび42℃ に保 持 した 場 合,PBS中

で は1日

目で 菌 は検 出 で き な か った が,牛

乳 中 で は漸 次 減

少 は して い る も の の 生 残 菌 が 認 め られ た(Fig.

4).

4. 小 児 下 痢 患者 の 病 因検 索

各 月 毎 の 検 体 数 とC.jejuni, Salmonella, Rota

virus各 病 院 毎 の 検 出 状 況 をFig.5に 示 し た. C.jejuniは 特 定 の 月 に か た よ ら ず 年 間 を 通 じ て 検 出 さ れ,Salmonellaは4月 か ら11月 に,Rota virusの 殆 ど が12月 か ら3月 に か け て 検 出 さ れ た.ま たFig.6に は 年 齢 別 に み た 検 体 数 お よ び 検 出 数 を 示 し た.C.jejuni,Salmonellaは ど の 年 齢 に お い て も 検 出 さ れ,そ の 検 出 率 は 各 々24.8% (76/307)な ら び に8.1%(25/307)で あ っ た がRota virusは 検 出 率7.6%(23/307)の うち91.3%ま で が2歳 以 下 の 幼 児 に 集 中 し た.ま たC.jejuniと

(5)

昭 和59年12月20日 1275

Fig. 6 Age distribution of diarrheal pathogens

from infants with diarrhea.

(1) N.Hospital

(2) P.Hospital

Salmonellaお よ びC.jnjuniとRota virusの 複

合 感 染 例 が 各 々5名(男 児5歳2名,女 児5歳1 名,男 女3歳 各1名)な ら び に2名(男 児2歳, 1歳 各1名)認 め られ た.便 性 か ら み る と 前 者 で は 男 女 と も黄 褐 色 便 で,後 者 で は 白 色 か ら 灰 白 色 便 で あ っ た.季 節 的 に は 前 者 で は 年 間 を 通 し て み ら れ た け れ ど も 後 者 で は1月,3月 に み ら れ た. Table1に 示 す よ う にN病 院 のCjejuni検 出 率 は26.3%(57/217)で あ りSalmonellaな ら び に virusを も 含 め た 病 原 微 生 物 検 出 総 数 の58.2% (57/98)に あ た る.P病 院 のC.jejuni検 出 率 は 2L1%(19/90)で あ り病 原 微 生 物 検 出 総 数 の 73.1%(19/26)に あ た る.N,P両 病 院 を 合 わ せ たC.jejuniの 検 出 率 は 病 原 微 生 物 検 出 総 数 の 61.3%(76/124)で あ っ た.x2 testの 結 果N病 院 のC.jejuni検 出 率 は,P病 院 の そ れ に 比 し て 有 意 に 高 い こ と が 認 め ら れ た(p<0.05). 5. 都 市 ガ ス 環 境 下 培 養 で のC.jejuniの 検 出 予 備 試 験 で 純 培 養 のC.jejuniの 分 離 を 従 来 用 い ら れ て い る 微 好 気 的 環 境 下(Standard法)お よ び 都 市 ガ ス 環 境 下(Town gas法)で 検 討 し た 結 果,両 法 間 に 差 異 を 認 め な か っ た の で 病 院 由 来 の 検 体 に つ い て も 両 法 を 実 施 し,そ の 結 果 を 比 較 し た(Table2).検 体 総 数233件 中,Standard法 で 培 養 し た も の はC.jejuniが55件 陽 性 で あ っ た の に 対 し,Town gas法 で は13件 の み が 陽 性 で あ っ

た.Town gas法 で 検 出 し た 検 体 は 全 てStandard

Table 1.

Isolation of Campylobacter jejuni from various materials.

* Containing six strains of S. paratyphi B/ java. ** not carried out.

(6)

Table 2. Comparison of Campylobacter jejuni

detection in the standard and town gas

method.

*

Microaerobic condition (O2: 5%, CO2: 10%, N2:

85%) ** Composition:02-2, CO2-10, N2-40, H2-46, CO-5, CH4-22, CmHn-5 (Volume %). 法 で 検 出 し た. 6. ニ ワ ト リか ら のC.jejuniの 検 索 Table1に 示 す 如 く ニ ワ ト リの 直 腸 便45検 体 中 18件 が 陽 性 で 検 出 率 は40.0%,テ バ で は9検 体 中 1件 陽 性 で 検 出 率 は11.1%,ミ ン チ 肉3検 体 か ら は 検 出 し え な か っ た. 考 察 C.jejuniは 既 に ヒ トの 急 性 下 痢 症 の 主 要 な 起 因 菌 の 一 つ と し て 認 識 さ れ て い る.ま た 本 菌 は ニ ワ ト リ,ブ タ,ウ シ,イ ヌ な ど に も 高 率 に み ら れ, そ れ ら の 動 物 に 下 痢 を お こ す 菌12)と し て 知 られ て い る.仲 西 ら13)は,ニ ワ ト リ 肉 よ り9.0%,ク ロ ア カ ス ワ ブ よ り40.7%,ま た 吉 村 ら14)は,ニ ワ ト リ排 泄 便 よ り60.0%で 本 菌 が 検 出 さ れ た と報 告 し て お り,我 々 の 成 績 で は ニ ワ ト リの 直 腸 便 よ り40.0%, テ バ で は11.1%で ニ ワ ト リ は 高 い 保 菌 動 物 と言 え る 。 ま た ヒ トの 病 原 菌 と し て は,ま だ そ の 生 態 学 的 詳 細 が 明 ら か に さ れ て い な い の で 今 後 追 求 さ れ る べ き 問 題 と 考 え られ る.我 々 の こ の 調 査 で 小 児 下 痢 患 者 か ら のC.jejuni検 出 率 は24.4%で,Sal-monellaの8.1%よ り高 く,WHOは 急 性 下 痢 症 の 制 圧 計 画 でC.jejuniを そ の 重 要 な 対 象 と し て い る こ と が うな づ け る.前 回 の 調 査9)で は,患 者 便 に お け るC.jejuni検 出 率 は8.6%で あ り,今 回 の 調 査 と 比 べ る と低 い.こ れ は 当 初,便 を そ の ま ま 検 体 と し て 供 し た 時 期 が あ り,検 体 輸 送 に 問 題 が

あ った も の と考 え られ る.現 在 便 の検 体 輸 送 に は

Cary-Blair輸

送 培 地 が 汎 用 され て お り,Fig.3か

ら推 察 され る よ うに,本 培 地 はCjejuniの

生 残 性

が高 い こ とか ら,本 菌 の 検 出 に有 効 な培 地 で あ る

と考 え られ る.ま た 本 菌 の培 養 に 当 り,025%,

CO210%,N285%の

微 好 気 的 環 境 下 で 培 養 す る

の が 常 法 で あ る が,我 々 は この 混 合 ガ スの 代 りに,

容 易 に 入 手 可 能 な都 市 ガ ス を 用 い た 場 合 を 検 討 し

た.そ

の結 果 純 粋 培 養 菌 で はStandard法

と同 程

度 の 発 育 を示 した が,下 痢 便 か ら の 本 菌 の 分 離 率

はTowngas法

で は低 か った.こ

れ は従

来Cje-juniが 生 育 環 境 と して02濃 度 が 大 き く影 響 し て

い る もの と考 え られ て お り,都 市 ガ ス中 の02濃 度

が2%と

低 い た め か,他 の 組 成 に よ る影 響 な の か,

また 検 体 側 の何 か 特 別 な要 因 に よ る もの か は不 明

で あ る.ま た 注 目す べ き こ

とは,C.jejuniとSal-monella, C.jejuniとRota

virusの 複 合 感 染 例 が

認 め られ た こ とで あ る.近 年,微 生 物 学 的 検 査 手

技 の 進 歩 に よ り感 染 症 の病 因 検 索 が 多 面 的 に行 わ

れ る よ うに な り,同 時 に複 数 の 病 原 体 に よ る感 染

例 が 証 明 され る場 合 は決 して まれ で は な い15).吉

岡 ら16)は小 児 の 下 痢 症 で細 菌 と ウイ ル ス の 混 合 感

染 が10∼15%と

報 告 した.そ

の 頻 度 は 病 原 体 の 組

み 合 わ せ,臨

床 病 型,年

齢,環 境 条 件 あ る い は 調

査 時 期 に よ って 変 わ る もの と思 わ れ るの で,一

の 患 者 か らの病 原 体 検 出 と感 染 像 を ど う結 び つ け

た ら よ い の か,そ

の解 析 に 苦 しむ こ とが 少 な くな

い.即

ち,病 原 体 とそ の疾 患 との 因 果 関 係 を 「

疾 患 一 病 原 体 」的 な 素 朴 な考 え で 処 理 す る こ とは,

病 因 決 定 で誤 った 決 定 を す る危 険 性 を は らん で い

る も の と思 わ れ る.

一 方

,ヒ トへ のC.jejuniの

感 染 様 式 の 多 くは 上

述 した よ うな ペ ッ ト又 は 保 菌 獣 か ら飲 食 物 を 介 し

て 感 染 が成 立 す る もの と考 え られ,Blaserら17)は

犬 か ら ヒ トへ,Skirrowら18)は

ネ コか ら ヒ トへ の

感 染 例 を報 告 し,Blaserら19)は

ヒ トか ら ヒ トへ の

二 次 感 染 を報 告 した.我

々 の今 回 の 調 査 で2名

小 児 は8∼9ヵ

月 間 もの 長 期 にわ た っ て本 菌 が 検

出 され た が,こ れ は そ の 間 に再 感 染 が あ った と し

て も ヒ トも重 要 な感 染 源 と な り うる こ とを 示 唆 し

て い る もの で あ ろ う.ま た 伊 藤 ら20)は生 肉 中 のC.

(7)

昭 和59年12月20日 1277

jejuniは,25℃

や37℃ 保 存 で は 急 激 に菌 が 死 滅 し

た が,4℃

で は 菌 が長 期 間 生 存 し うる と報 告 した .

我 々は 今 回Fig.4に 示 した よ うに牛 乳 中 で も4℃ 保

存 した 場 合 本 菌 は1週 間 経 過 して も接 種 時 と同 程

度 の 生 残 数 を 認 め た.こ

の こ とは 本 菌 食 中 毒 の 感

染 様 式 を 考 察 す る上 に 注 目す べ き こ と と 言 え よ

う.Taylonら21)お

よ びRobinsonら22)は

殺 菌 不 十

分 な 牛 乳 が,伊 藤23)は ニ ワ ト リ肉 が 原 因 食 品 と

な った 例 を報 告 し て い る.以 上 の よ うに人 獣 共 通

の疾 患 で あ るC.jejuniに

よ る腸 炎 に つ い て は感

染 経 路 な らび に 臨 床 症 状 に 多 様 性 が あ り,抗 原 構

造 や 下 痢 の 主 因物 質 に不 明 の 点 が 多 く,今 後 残 さ

れ た 問題 と考 え られ る.c.jejuniの

生 態 学,疾 患

の 疫 学 お よ び感 染 防 御 対 策 を 推 進 す る た め に,本

菌 の血 清 型 分 類 を世 界 的 規 模 で統 一 確 立 す る こ と

が 必 要 と思 わ れ る.

C.jejuniは

最 近 ヒ トの 腸 管 感 染 症 の 原 因 菌 と

して 認 め られ,し

か も現 在 わ が 国 で も っ と も高 率

に 検 出 さ れ る腸 炎 起 因 菌 で あ る.こ

こで は本 菌 の

培 養 性 状 に つ い て 基 礎 的 な検 討 を加 えた 外,小

下 痢 患 者 か らの 病 因 検 索 を 行 い,以 下 の 結 果 を得

た 。

1) C.jejuniお

よびC.fetus

ss.

fetusの 至 適 温

度 は臨 床 用 チ オ グ リコ レー ト培 地 中 で は,そ れ ぞ

れ36.5℃ お よ び32.5℃ 付 近 に あ った.

2) 糞 便 中 で は,Cjejuniは

不 安 定 で 検 体 輸 送

に はCaryBlair輸

送 培 地 が 有 効 で あ る こ と を 示

した 。

3) 殺 菌 不 十 分 な 牛 乳 は,C.jejuniの

感 染 源 と

な り うる こ とを 示 唆 した.

4) 小 児 下 痢 患 者 か らのC.jejuni,

Salmonella

お よ びRota virusの 検 出率 は,そ れ ぞ れ24.8%,

8.1%お

よ び7.6%で

あ った.ニ

ワ ト リか ら も高 率

にC.jejuniを

検 出 した.

5) Cjejuni培

養 の ガ ス 環 境 と して 微 好 気 的 環

境 下(O2

5%)お

よ び都 市 ガ ス環 境 下(02

2%)

で 比 較 し,小 児 下 痢 患 者 便 か らのCjejuni検

出 率

はそ れ ぞ れ55/233(23.6%)お

よ び13/233(5.6%)

で あ った 。

6) C、jejuniとSalmonella,

C, jejuniとRota

virusに よ る混 合 感 染 例 が,そ れ ぞ れ5名

お よ び

2名 認 め られ,下 痢 症 の検 索 に は細 菌 学 的 の み な

らず ウ イ ル ス 学 的 検 索 も 必 要 で あ る こ とを 示 し

た 。

稿を終えるに当 り菌株の分与をいただいた神戸市環境保

健研究所仲西寿男博士お よび兵庫県立加古川病院 山根三十

六氏に対 し,ま た小児か らの検体採取 に御尽力いただいた

パルモア病院お よび神戸市立西市民病院小児科関係各位に

対 し深謝致 します.

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Children's Diarrheal Disease Associated with Campylobacter jejuni

Kunio SHIMADA, Hidetaka TSUJI, Kazuo ONO & Eiji KIMURA

Division of Microbiology, Public Health Institute of Hyogo Prefecture, 2-1-29 Arata-cho,

Hyogo-ku, Kobe 652, Japan

As it is well known, Campylobacter jejuni is a common cause of human enteritis. This paper describes the basal examination on Campylobacter and the isolation of Campylobacter jejunifrom chickens and C. jejuni,Salmonella and Rota virus from children's diarrheal stool.

The optimum temperature of C.jejuni and C.fetus ss fetus was respectively 36.5•Ž and 32.5•Ž in a clinical thioglycolate medium. Both of them attained the growth plateau when they were cultured for 70 hr at 37•Ž.

The Cary-Blair transport medium was suitable for the stool transportation, because C.jejuni exhibited a high survival rate. The isolation rate of C. jejuni, Salmonella and Rota virus from children's diarrheal stool was respectively 24.8%, 8.1% and 7.6%. C. jejuni was found through out the year, but Salmonella was found frequently in summer, while Rota virus was found in winter.C. jejuni and Salmonella were isolated irrespective of age, however Rota virus was found most (91.3% of the isolated) among infants under two years of age. Five cases were found the mixed infection of C.jejuni and Salmonella, and 2 cases were found of C.jejuni and Rota virus.

C. jejuni isolated from chickens was 18 of 45 droppings (the isolation rate 40.0%), one of 9 wings (11.1%), and none of 3 minced meats.C.jejuni survived very well in milk, the number of organisms decreased gradually when stored at 25•Ž or 37•Ž, but retained the initial level at 4•Ž even after one week. This can not be avoidable in the thinking of infective mechanism of the organisms.The im-portance of Campylobacter as a new enteropathogen was discussed.

Fig.  2  Growth  of  Campylobacter  at  various  time
Fig.  5  Monthly  appearance  of  diarrheal  pathogens  and  patients  from  pediatric wards  of  two  hospitals.
Fig.  6  Age  distribution  of  diarrheal  pathogens from  infants  with  diarrhea.

参照

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