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氏 名(生 年 月 日)
本
籍
学 位 の 種 類
学 位 授 与 の 番 号
学 位 授 与 の 日 付
学 位 授 与 の 要 件学 位 論 文 題 目
論 文 審 査 委 員
ヤ マ 労 タ ヒ デ ハ ル 山 縣 英 晴博 土 (医学)
甲 第256号 平 成 7 年 3 月 17日 学 位 規 則 第 遁 条 第 1 項 該 当 (医 学 研 究 科 専 攻, 博 士 課 程 修 了 者) 腕 VeIS Of V並amin K, 楡 m ㎜n0 欄 鮒 iW p正0 鮎 rO 舳 in,a 鵠 ・γ・Ca 曲 OX ” m 脈 rO ㎜ bi皿 a 羽d γ・ 91㎜ta m y1 CarhOXy1aSe aCtiYity in hepatOCe1lu1ar Car一 εim O m a tiSSme (肝 綱 胞 癌 の 異 常 プ ロ ト ロ ン ビ ン 産 生 機 序 に 関 す る ビ タ ミ ン K, プ1コ ト ロ ン ビ ン 前 駆 体 量 及 び γ一グ ル タ ミ ル カ ル ポ キ シ ラ ー ゼ 活 性 の 研 冤)(主 査) 教 授
林
直 諒
(副 査) 教 授
高 桑
雄 一, 高 崎
燵
論
文
内
容
の
要
旨
帽 的〕
肝 細 胞 癌 (亘CC〕 の 診 断1こ 有 用 な 腫 瘍 マ ー カ ー で あ る H V K A一王I (1)es一γ一carboxy prothro m b{n, D C P) は , warfarin 投 与 や ビ タ ミ ン K (vitI K) 欠 乏 樹 こ お い て も 血 刺 こ 増 加 す る 異 常 プ ロ ト ロ ン ビ ン で あ り, カ ル ボ キ シ ル 化 カ§不 十 分 で 凝 固 活 性 を 持 た な い. 本 研 究 で は 賞 CC に お け る P正V K A・n 産 生 機 序 を 明 ら か に す る こ と を 目 的 に 貯 癌 組 織 の マit, K, プ ロ ト ロ ン ビ ン 前 駆 体 量 お よ び γ一グ ル タ ミ ル カ ル ボ キ シ ラ ー ゼ (カ ル ボ キ シ ラ ー ゼ) 活 憧 を 測 定 し た. ま た 併 せ て 肝 癌 培 養 細 胞 の プ ロ ト ロ ン ビ ン 蔚 駆 体 産 生 能 を 検 討 し た.〔対 象〕
肝 硬 変 を 基 礎 病 変 と す る26例 (B 型 3, C 型22, ア ル コ ー ル 憧 1 例) の H CC 患 者 か ら 手 術 で 摘 出 さ れ た 癌 都 お よ び 非 癌 肝 組 織 を 用 い た. 肝 癌 培 養 細 胞 は PIV K A-II を 大 劉 こ 産 生 す る こ と が 知 ら れ て い る hu- H1 お よ び hu-H 2 を 用 い た. 〔方 法〕 肝 組 織 中 の v1t. K 定 量 は 高 速 液 体 ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー に よ る 紫 外 吸 収 検 出 法 に 拠 っ た. プ ロ ト ロ ン ビ ン 前 駆 体 量 は ポ リ ク ロ ー ナ ル ウ サ ギ IgG 抗 体 を 用 い た 肌 ISA 法 に て 測 定 し,P工V K A・n は モ ノ ク ロ ー ナ ル 抗 体 を 用 い た ELISA キ ッ ト で 濁 定 し た. カ ル ボ キ シ ラ ー ゼ 活 性 は, 組 織 よ り 超 遠 心 法 に て 分 離 し た ミ ク ロ ソ ー ム 分 画 を 可 溶 化 し, こ れ に 取 り 込 ま れ る1℃ O O H の 放 窮 濫 陛 を シ ン チ レ ー シ ョ ン カ ウ ン タ ー で 測 定 す る こ と に よ っ て 求 め た. 統 計 学 的 分 析 ほ M ann-W h1tney U test を 用 い, p < 0.05を 有 意 と し た. 〔結 果〕 肝 癌 纏 織 と 非 癌 肝 組 織 に お け る v1t.K (vit.K1 菊よ び 醐e m Qむim ne・逐) の 量 に 有 意 差 は 無 か っ た. プ ロ ト ロ ン ビ ン 前 駆 体 は 肝 癌 纏 織 で は 非 癌 組 織 に 比 し て 有 意 に 増 加 し て い た. (血 申 PIV K A-I互 陽 性 例 :439 ±367 vs 214 ± 王25ng/m g protein (m ean ± S.D., n = 8), 腕 申 凹 V KA・II 陰 性 例 :374 土2工6 vs 15 肚 67 (n =4), p く0.05). カ ル ボ キ シ ラ ー ゼ 活 性 は 単 位 基 質 量 当 た り の 比 較 で は 肝 癌 組 織 は 非 癌 組 織 に 比 し て や や 低 下 し て い た も の の, 有 意 差 は 認 め な か っ た. (腕 中 P玉V K A-II 陽 性 例 : 335 ± 72 マs 372 ± 67 n m o1/min/ 搬 墓 proth- ro ㎜ bin pre ㎝ rsor (η =・8), 1血 中 PIV K A-II 陰 性 例 : 370 士8逐 vs 393± 56 (nご 6)). ま た 5 日 間 培 養 後 の hu一 胆 と h汰 H2 の 培 養 液 に は P W K A・五I と 共 に 多 量 の プ ロ ト ロ ン ビ ン 前 駆 体 カ茎検 艶 さ れ た. 〔考 察 お よ び 結 論ヨ 肝 癌 組 織 を 用 い た 測 定 よ り, HCC に お け る PIV K A一互I 産 生 機 序 と し て は 癌 部 の 局 所 的 vit, K 欠 乏 や 肝 癌 細 胞 の カ ル ボ キ シ ラ ー ゼ 活 健 の 低 下 の 関 与 は 少 な い と 考 え ら れ た. 一 方, プ ロ ト ロ ン ビ ン 前 駆 体 の 大 一 556 一53 蚤 産 生 ほ 騎 癌 纏 織 と 駅 癌 轄 養 綴 鰹 の 爾 者 で 認 め ら れ, プ 田 ト 回 ン ど ン 繭 騒 鉢 の 太 嚢 産 塗 紬 カ ル 斌 キ シ ル 化 の 不 十 分 塗 PW KA一玉互 の 産 隻 の 室 困 ㌘ あ る 珂 能 燈 納 高 い .