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1) AlP: a-naphthyl phosphate 10 mg, diazo blue B 20 mg Clark and Lub's buffer ph 9.2 2) AcP: a-naphthyl phosphate 10 mg, diazo 3) 0-Est: 0-naphthyl ac

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Academic year: 2021

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昭和41年2月 151 食 道 お よ び 舌 の 扁 平 上 皮 癌 の 組 織 化 学 的 研 究* 岡山大学田中外科 清 藤 敬 河 島 隆男 竹 本 茂 延藤 栄 男 竹 内鬼 三郎 緒方 卓郎 緒 言 近 年 の 組 織 化 学 の 進 歩 に よ り各 種 腫 瘍 の 代 謝 状 態 を 酵 素 組 織 化 学 的 に 明 ら か に し よ う とす る 研 究 は 数 多 く な さ れ て い る.消 化 管 腫 瘍 に お い て は 主 と し て 腺 癌 に つ い て の 研 究 が 報 告 さ れ て 来 た が 食 道 お よ び 舌 の 扁 平 上 皮 癌 に 関 す る こ の種 の 報 告 は ほ と ん ど見 ら れ な い.私 達 は こ こ3年 来 に 経 験 し た1例 の 舌 癌,7例 の 食 道 癌 お よ び2例 のLeuk-oplaciaを 酵 素 組 織 化 学 的 に 検 討 し た の で 報 告 す る. 検 索 し た 酵 素 はAlkaline phosphatase(AIP), Acid phosphatase(AcP),β 一Esterase(β 一Est), Aminopeptidase(AmP)お よび β一Glucuronidase

(β一Gl)の5種 の 水 解 酵 素 とSuccinic dehydroge寺

nase (SDH), Lactic dehydrogenase (LDH), Malic dehydrogenase (MDH) , a-Glycerophosp-hate dehydrogenase (a-GDH) , Glutamic dehyd-rogenase (GDH) ,G-Hydrogybutyric dehydroge-nase (f3-HDH) , Glucose-6-phate dehydrogedehydroge-nase

(G6PDH)お よ びIsocitric dehydrogenase(IDH) の8種 の脱 水 素 酵 素 で あ っ た. 実 験 材 料 お よ び 方 法 材 料 は す べ て 外 科 的 に 切 除 さ れ た 人 の 舌 癌 お よ び 食 道 癌 を 使 用 し た.手 術 患 者 は 術 前 夜 よ り絶 食 と し,前 投 薬 と し て は ラ ボ ナ ー ル,オ ピ ス タ ン, リ チ ネ 等 で あ り,手 術 は す べ て 笑 気,フ ロ ー セ ン に よ る 全 身 麻 酔 を 行 つ た.ま た 食 道 癌 の うち3例 は60Co1000∼2000γ の 術 前 照 射 を 受 け て い た. 切 除 標 本 よ り癌 及 び そ の 周 辺 部 を 切 除 し,-30 ℃ の フ リ ー ザ ー 中 に 保 存 し 可 及 的 早 期 に 次 の 操 作 を 行 つ た. -20℃ の ク リオ ス タ ツ トで20μ の 連 続 切 片 を 作 製 し下 記 の反 応液 中 で反 応 させ,同 時 に染 色 した H.E標 本 を 対 照 と して光 学 顕 微 鏡 に よる酵 素 組 織 化 学 的 研 究 を 行 っ た. 各 種 反 応 液 組 成 水 解 酵 素(10%ホ ル マ リ ンで10分 間 固宗 後) 1) AlP: a-naphthyl phosphate 10 mg, diazo blue B 20 mg Clark and Lub's buffer pH 9.2 20ml,20℃ で30分 間 反 応

2) AcP: a-naphthyl phosphate 10 mg, diazo blue B 20 mg, Michaelis buffer pH 5.8 20 ml 20℃ で1時 間反 応

3) 0-Est: 0-naphthyl acetate 10 mg, diazo blue B 20 mg, Michaelis buffer pH 7.2 20 ml

20℃ で30分 間 反応

4) AmP: 1-leucyl-$-naphthylamine

hydrochr-oride 8 mg, acetate buffer pH 6.5 10 mg, 2/100 M KCN 1 ml, diazo blue B 10 mg 37 C, 30•`60

分 間 反 応 さ せ,次 い で 食 塩 水 で 洗 い 数 分 間1/10M coppersulfate溶 液 に 浸 す.

5) •kC1•l 6-bromo-2-naphthyl-ƒÀ-d-glucuronide

15mg, phosphocitric buffer pH 4.95 10 ml,

me-thanol2.5ml, Aq. dest37.5ml,37℃ で6時 間 五 液 中 で4℃,10分 間 反 応 さ す.

CID D 0.02 M hposphate buffer pH 7.5 50 cc, diazo blue B 50 mg.

脱水素酵素

1) SDH: M/5 sodium succinate 5 ml, M/10 phosphate buffer pH 7.6 5 ml, nitro BT 5 mg/3 ml 6 ml, Aq, dest. 10 ml,

2) I ,DH : M/2 sodium lactate 4 ml, M/10 phosphate buffer pH 7.5 10 ml, nitro BT 5 mg/ 3 ml 3m1, 100% NAD 2,5 ml, M/2 HC1 5 drops 3) MDH: 1M sodium malate 5 ml, M/10 phosphate buffer pH 7,4 10 ml, nitro BN 5 mg/3

*本 論 文 要 旨 の一 部 は 第6回 日本 消 化 器 病 学 会秋 期 大 会 に お い て発 表 し た.

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152 日本 消化 器 病 学 会雑 誌 第63巻 第2号

ml 3ml,100% NAD 2,5mg,M/10 KCN 2ml, M/2 HCl 5 drops

4) α 一GDH,GDH,β 一HDH,1M sodium α 一 glycerophosphate,sodium glutamate,sodium β 一 hydroxybutyrate 4ml,M/10 phosphate buffer pH 7,6 11ml,nito BT 5mg/3ml 3ml,100% NAD 2.5mg,M/10 KCN 2ml,M/2 HCI 5 dro-ps.

5) G6PDH:M/200 glucose寺6-phosphate 6ml, Veronal bufrer pH7,4 17ml,nitro BT 5mg/3ml

4,4ml,100% NADP7mg,M/100MgCl2 3ml, M/2 MnCl2 3ml

6) IDH: M/10sodium isocitrate 4ml,Vero-nal acetate buffer pH7,411ml,nitro BT,5mg /3ml 3ml,100%NADP 2,5mg,M/100Mg Cl2 2ml,M/2MnCl2 2ml37℃ で30∼40分 間 反 応 後10%ホ ル マ リ ン で 固 定 反 応 終 了 後,バ ル サ ム ま た は グ リ セ リ ン で 封 入 し 検 鏡 し た. 実 験 結 果(表1,2) 1.食 道 癌 水 解 酵 素AIP染 色 は 毛 細 血 管 壁 に 陽 性 で あ る ほ か 食 道 癌 お よ び 正 常 食 道 上 皮 で は 一 般 に 陰 性 で あ っ た が,(図1)一 部 癌 間 質 に ± ∼ 十 の 染 色 性 を 認 め た.こ の 傾 向 は 浸 潤 性 の 症 例 に 著 明 で あ つ た. AcP染 色 に お い て は 浸 潤 性 の 癌 組 織 が 正 常 上 皮 よ り も 染 色 性 が や ≧増 強 し て い た.癌 間 質 に お い て は ほ と ん ど 陰 性 で あ っ た.正 常 上 皮 で は 角 化 層 表1水 解酵素 よ りも基 底 細 胞 層 がわ ず かに 強 く染 色 してい るの が認 め られ た. β一Est染 色 は,癌 組 織 で 正 常 上 皮 に お け る よ りも染 色性 が や ≧低 下 してい た が,浸 潤 性 の癌 の 1例 で はそ の浸 潤先 端 部 が か な り強 く染 色 して い た. AmP染 色 は食 道 癌 で陰 性 で あ っ たが,癌 間 質 に非 常 に弱 い 染 色性 を示 す も のが あ っ た.正 常 上 皮 で は ほ とん ど陰 性 か ま たは 弱 陽 性 で あっ た. β一Gl染 色 は癌 組 織 で 正常 上 皮 に比 較 しやゝ 染 色性 の増 強 して い る症 例 が あっ た が,一 般 に 両 者 に大 差 は なか っ た.正 常 上 皮 で は 角化 層 が 強 く染 色 す る傾 向 が あ り,癌 真 球 で も周 囲 に比 較 し染 色 性 が 強 い こ とが認 め られ た.ま た 癌 中 心 部 の壊 死 に お ちい つ た部 で強 陽 性 を示 した ものが あ っ た. (図2) 脱 水 素酵 素,癌 組 織 に お け るSDH染 色 は一 様 で な く,所 に よ り弱 また は軽 度 の活 性 を示 した. 表2脱 水 素 酵 素 (32)

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昭 和41年2月 155 しか し全 般 に 正 常 上 皮 とほ とん ど同 程 度 の 染 色 性 を 示 した.浸 潤 先 端 部 また は 癌 の小 集簇 に 中 等 度 の染 色 性 を 示 す もの もあ っ た(図3).間 質 の 活 性 は非 常 に弱 か っ た.正 常 上 皮 で は 基 底 細 胞 層 に 明 らか に 強 い 染 色 性 が 認 め られ た(図4). LDH染 色 性 も癌 組 織 と正 常 上 皮 とほ とん ど同 程 度 で あっ た.正 常 上 皮 で は 基 底 細 胞 層 にや ≧染 色 性 が 強 か っ た(図5)。 MDH染 色 性 はSDHと 同様 の傾 向 を示 し,癌 組 織 にお いて は浸 潤 性 の癌 の小 集簇 に 中 等 度 の染 色 性 が 見 られ た. α一GDH染 色 もSDHと 同様 に癌 組 織,正 常 上 皮 とも に ほ とん ど同程 度 の染 色性 を 示 した が,間 質 増 殖 の強 い癌 組 織 で中 等 度 の染 色 性 を 示 す もの が あつ た. GDH染 色 も癌 組 織 と正 常 上 皮 と大 体 同 様 の染 色 性 を示 した.正 常 上 皮 では 基 底 細 胞 層 にや ≧染 色 性 が 強 く認 め られ る も のが あっ た が,SDH染 色 に お け る ほ ど著 明 で は なか っ た. β一HDH染 色 も前 述 の脱 水 素 酵 素 と大 体 同様 の 傾 向を 示 し た.浸 潤 性 の癌 の小 集簇 に 中等 度 の活 性 を 示 す も のが あっ た.(図6) G6PDHは 上 記 脱 水 素 酵 素 と異 つ た 染 色 傾 向 を 示 し た.正 常 上 皮 にお い て は角 化 層 に最 も染 色 性 が 強 く,棘 細 胞 層 で は 低 下 して いた(図7).癌 組 織 で は 正 常 上 皮 にお け る よ りも染 色 性 が 上 昇 し て お り,癌 真 珠 で は 一層 染 色 性 が 強 か っ た(図 8).癌 間 質 の染 色性 は陰 性 で あっ た. IDHも 癌 組 織 で は正 常 上 皮 に お け る よ りもや ≧染 色性 が 強 か っ た.癌 真 珠 で は周 囲癌 組 織 よ り や ≧染 色 性 が 強 く,正 常 上 皮 で も角 化 層 に染 色 性 が 強 か っ た がG6PDH染 色 に お い て認 め られ た ほ ど の差 は なか つ た. 2.Leukoplakia使 用 し た2例 のleukoplakia は い ず れ も食 道 癌 に合 併 した もの で あ っ た.癌 細 胞 浸 潤 は 見 られ ず,肥 厚 した 棘 細 胞 層,錆 角化 層, 角 化 層 を 認 め 上 皮 下 に リ ンパ 球 を 主 と した 多 数 の 細 胞 浸 潤 を 認 め た.こ の様 な肥 厚 した 上 皮 の染 色 性 は ほ とん ど正 常 食 道 上 皮 の染 色 性 に 一 致 して い た.し か しAcP染 色 が 基 底 細 胞 層 で 強 い 傾 向 は 見 られ な かっ た.細 胞 浸 潤 の部 の染 色 性 は す べ て 非常 に弱 い か また は陰 性 で あ っ た. 同時 に観 察 した食 道 腺 の染 色 性 はAcP染 色 が 中 等度 陽 性 で あっ た ほ か は,す べ て弱 陽 性 で あっ た 。 3.舌 癌,使 用 した 標 本 は比 較 的 末 分 化 で 浸 潤 性 の強 い癌 で あっ た. AIP,AcPは 癌 組 織 で 染 色 性 が陰 性 で あっ た が 癌 間質 で は弱 陽 性 で あっ た. β一Glは癌 で軽 度,間 質 で弱 い染 色 性 を示 した. 脱 水 素 酵 素 の うちSDH染 色 は癌 組 織 で弱 陽 性 で あ っ たが,LDHは 中 等 度 また は それ 以 上 の染 色性 を示 した.LDHで は 癌 間 質 に も軽 度 の染 色 性 が認 め られ た.そ の他 の脱 水 素 酵 素 染 色 は 一般 に癌 に お い て軽 度 も し くは 弱 陽 性 で あっ た 。 また 問質 に お け る染 色 性 は いず れ も非 常 に弱 いか,陰 性 で あ っ た.正 常 上 皮 の染 色 性 は食 道 上 皮 の染 色 性 に類 似 して い た.し か しAmP染 色 性 は 舌 の 扁 平 上 皮 にわ づ か に認 め られ た. 考 按 AIPは 毛 細 血 管 に 強 い 活 性 を示 す が,正 常 食 道 上 皮 に は陰 性 で あっ た.森 ら1)は 正 常 口腔 粘 膜 の 頬,舌,歯 肉等 にお い て もAIPは 分 布 せ ず,AcP は 存在 しかつ 粘 膜 表 層 に 活 性 が強 い と の べ て い る.癌 に お い て もAIPは 陰性 で あっ たが 癌 間 質 にAIPが 時 に 陽 性 で あ る とい う報 告 は 他 に もあ る2).本 研 究 結 果 では 浸 潤 性 の強 い 癌 の 間 質 に AIPの 弱 い 活 性 が認 め られ た が,Monisら3)は 間 質 のAIP活 性 と浸潤 性 の 間 に は相 関 関係 は ない との べ て い る.AcPは 本 研 究 に お い て浸 潤 性 の癌 で は 正常 上 皮 よ りやゝ 活 性 の亢進 して い るの が 見 られ た が,Okaら4)は 舌 癌 に お い て癌 組 織 で 活 性 が低 下 す る とのべ てい る.本 研 究 で も舌 癌 に お い て は 同様 で あ っ た.ま たKawakatu2)ら は 角 化 の 見 られ る癌 でAcP活 性 の 亢進 す る こ とを 報 告 し て い る が本 研 究 では そ の様 な所 見 は得 られ なか つ た.食 道 癌 の β一Estは 正 常 部 とほ とん ど 同 等 か ,やゝ 低 い活 性 を 示 した が 浸潤 性 の癌 で1例 のみ か な りの活 性 を示 す も のが あ っ た.Kawakatuら 2)は 扁平 上 皮 癌 で β一Estの強 い活 性 を認 め た との (35)

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156 日本 消 化 器 病 学 会雑 誌 第63巻 第2号 べ て い る が,Cohεn5)ら は 皮 膚,舌,食 道 類 上 皮 癌 に 活 性 が な か っ た と の べ て い る.AmPは 舌 お よ び 食 道 の 癌 組 織 で 陰 性 で あ っ た が そ の 間 質 に 弱 い 活 性 を 認 め,し か も 浸 潤 性 の 場 合 に 比 較 的 強 い 様 に 思 わ れ た.Braun-Falco6)は 間 質 のAmP活 性 の 強 さ は 癌 の 悪 性 度 を 示 す と の べ て い る.し か し 田 中 ら7)は 胃 癌 に お い て そ の 様 な 明 瞭 な 関 係 は 認 め ら れ な か っ た と の べ て い る.間 質 に お け る AnP活 性 は 炎 症 組 織 に お い て も 陽 性 で あ る こ と が あ り8)Glennerら9)は こ の 間 質 のAmP活 性 が proteolytic activityに よ る と の べ,ま たMonisら 10)はfibroblastの 増 殖 に 一 致 す る と の べ て い る . β一Glは 正 常 上 皮 で は 角 化 層 に や ≧活 性 が 強 い も の が あ り,癌 で も癌 真 珠 形 成 の 部 で は 周 囲 よ りわ つ か に 活 性 が 強 か つ た.Fishmanら11)は 新 生 物 で β一G1活 性 が 増 加 す る と の べ,Kawakatuら2)は post azo coupling法 に よ り癌 細 胞 と 正 常 上 皮 と が ほ と ん ど 同 様 の 活 性 を 示 し,類 上 皮 癌 の 浸 潤 先 端 部 で は 角 化 層 や 壊 死 層 よ り強 い 活 性 を 示 し た と の べ て い る.Monlsら12)は 上 皮 性 の 腫 瘍 で は β一G1 活 性 が 強 い の に 反 し,間 葉 起 源 の 腫 瘍 は 一 般 に 活 性 を 示 さ な い と報 告 し て い る. 癌 組 織 の 脱 水 素 酵 素 に つ い て の 組 織 化 学 的 研 究 は 多 く報 告 さ れ て い る.本 研 究 結 果 で は 水 解 酵 素 回 様 に 正 常 上 皮,癌 組 織 共 に 全 体 の 活 性 が 弱 い も の が 多 か っ た 。SDHお よ びNADを 助 酵 素 と す る 酵 素 活 性 は 正 常 上 皮 で は 基 底 細 胞 層 近 くに 活 性 の 強 い 傾 向 が あ りこ れ はSDHに お い て 最 も 著 明 で あ っ た.SDHに つ い て こ の 様 な 所 見 はMor. ら13),Kawakatuら2)も 報 告 し て い る.こ れ に 反 し,NADや を 助 酵 素 と す るG6PDHは 角 化 層 に 活 性 が や ≧強 い 傾 向 が あ り,IDHも 類 似 の 傾 向 を 示 す も の が あ っ た. Moriら13)は 口腔 内 編 平 上 皮 癌 に っ きSDH,M DH,LDHの3酵 素 の 検 索 を 行 い,癌 組 織 周 辺 で こ れ ら の 活 性 が 強 く角 化 屠 で 非 常 に 弱 い と の べ て い る.Monisら14)は 各 種 腫 瘍 の 脱 水 素 酵 素 活 性 を 調 べ,SDHは 腫 瘍 組 織 で 一 般 に 低 下 し て い る と の べ て い る.ま たLDH,MDHが や ≧強 い ほ か, GDH,β 一HDH等 は 一 般 に 扁 平 上 皮 癌 で は 活 性 が 弱 く,胃,腸 の腺 癌 よ りも活 性 が 弱 い こ とを報 告 して い る 、癌 組 織 の脱 水 素 酵 素 活 性 は癌 組 織 の 部 位 に よつ て もか な りな差 が あ り,田 中 ら15)は腸 の腺 癌 に お い て浸 潤 先 端 部 や散 在 す る小 癌 胞 巣 に 強 い活 性 を認 め た と報 告 して い る.本 研 究 の扁 平 上 皮 癌 で は前 述 した ご と く全体 の活 性 が弱 く,さ ほ ど 明瞭 に で は な いがSDH,α 一GDH β一HDH, MDH等 に そ の様 な傾 向を 示 す もの が あ っ た. NADPを 助 酵 素 と し五 炭 糖 燐 酸 系 路 に 属 す る G6PDHは 前 述 した脱 水 素 酵 素 と異 り,癌 で か な り強 い活 性 を示 す もの が あ っ た.Pearse16)は マ ウ ス の子 宮 扁 平上 皮 癌 で この酵 素 活 性 が 癌 周 辺 部 で 著 明に 上 昇 して い た とのべ て い る 。 これ に 反 し Moriら17)は 扁 平 上 皮癌 に お け るG6PDHは 癌 周 辺 部 で は 比較 的 活 性 が 低 く,錯 角 化 部 で活 性 が 高 く角 化 の行 われ る場 所 で は 五 炭 糖燐 酸系 路 の代 謝 が 比 較 的 亢進 して い る こ とを 推 察 して い る.同 じ くNADPを 助 酵 素 とす るIDHはSDH,M DH等 よ りもG6PDHに や ≧類 似 し た 活 性 傾 向 を示 した.Mori17)18)ら は 約200種 の腫 瘍 のG6P・ DH,IDH活 性 を検 索 した 結果,副 腎 皮 質 に 両 者 の 活性 が最 も強 くこれ らが ス テ ロイ ドホ ル モ ン と関係 が あ る とのべ てい る 。扁 平上 皮 癌 問 質 の脱 水 素活 性 は一 般 に非 常 に 弱 く,悪 性度 との関係 も 認 め が た か っ た. 注 意 すべ き こ とは 食 道 癌 の 内3例 が60Co照 射 後 の手 術標 本 で あ る こ とで あ る 。X線 照 射 後 の細胞 内酵 素 の変 化 につ い ては 今迄 に か な りの報 告 が見 られ,堀 ら19)はマ ウス に よる実 験 でSDHは ほ とん ど変 化 しな いが あ る時期 に は低 下 す る こ とを推 察 し,他 のTCA酸 化 系 酵 素 は 明 らか に低 下 し,核 酸 酵 素 系,フ オ ス ファ タ ー ゼ の一 部 は 亢進 す る もの が あ る とのべ て い る.伊 藤20)らは マ ウ ス唾 液腺 の 60Co照 射 後 のSDH活 性 変 化 を 追 求 し,低 下 の 傾 向を 示 した との べ て い る.ま た 波 多野 ら21)は 60Coに よ る数 種 の酵 素 変 動 をin vitroに お い て検 索 し,SH基 を 活 性原 子 団 とす る酵 素 は特 に放 射 線 の 作用 を受 けや す く,非SH基 の酵 素 は受 け 難 い また助 酵 素 と して のNADも γ線 の影響 を受 け 難 く,こ れ が 多量 に あ る とそれ を 助 酵 素 と す る (36)

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昭 和41年2月 157 Apo酵 素 の 変 化 を 防 ぐ と の べ て い る 」本 研 究 で は 放 射 線 の 影 響 に っ き 適 確 な 判 断 は 下 し得 な い が, 上 記 の 条 件 も 附 加 し て 考 え な け れ ば な ら な い. 結 語 5例 の 食 道 扁 平 上 皮 癌,2例 のleukoPlakiaお よ び1例 の 舌 扁 平 上 皮 癌 に っ き 酵 素 組 織 化 学 的 検 索 を 行 い 次 の 結 果 を 得 た. 1.AlP,AmPは 癌 組 織 で 陰 性 で あ る が,間 質 に 陽 性 の こ と が あ り,こ の 傾 向 は 浸 潤 性 の 癌 で 明 ら か に 認 め ら れ る も の が あ っ た. 2.SDHは 正 常 上 皮 の 基 底 細 胞 層 に 活 性 が 比 較 的 強 く 角 化 層 で 弱 い,他 にNADを 助 酵 素 とす る 酵 素 も こ れ に 近 い 傾 向 を 示 し た.こ れ に 反 し, G6PDHは 角 化 層 に 活 性 が 強 く棘 細 胞 層 お よび 基 底 細 胞 層 に 活 性 が 弱 か っ た. 3.扁 平 上 皮 癌 で は 一 般 に 酵 素 活 性 が 弱 か っ た.G6PDHは 癌 で か な りの 活 性 を 示 す も の が あ つ た. 4.癌 間 質 の 活 性 は 一 般 に 非 常 に 弱 か っ た. 稿 を 終 わ るに あ た り,御 指 導,御 校 閲 い ただ い た 田 中教 授,清 水 助 教 授 お よ び 多大 な技 術 的援 助 を い た だい た 大 阪 大 学 歯 学 部 の 森 助 教 授 に深 謝 し ます. 附 図説 明 1.正 常 食 道 粘 膜 上 皮Alp,Cap毛 細 血 管 2.食 道 扁 平 上 皮 癌 β一GI,n壊 死 部 3.同 上SDH,C癌 先進 部 4.正 常食 道 粘 膜 上 皮上 皮SDH,se上 皮 表層,b 基 底 細胞 層 5.正 常食 道 粘 膜 上 皮LDH,b基 底 細 胞 層 6.食 道 扁 平 上 皮 癌 β一HDH,C癌 先進 部 7.同 上G6PDH,se上 皮 表層,c癌 8.同 上G6PDH,P癌 真 珠 文 献 1) 森 他: 口腔 粘 膜 な らび に 歯 周 組 織疾 患 歯 肉 に お け るAlkaline phosphataseとAcid pho-sphataseの 組 織 化 学 的 研 究, 日本 口腔科 学 会 誌, 9: 239-245, S35.

2) Kawakatu, K., and Mori, M., Histochemical evaluation of enzymatic activities in human squamous cell cancer, Cancer Res., 23 : 539

-545, 1963.

3) Monis, B., et al.: Alkaline phosphatase acti-vity in neoplastic and inflammatory tissues

of man, Cancer, 13 : 538-544, 1960.

4) Oka, R., et al., Histochemical evaluation of alkaline and acid phosphatase activities in oral neoplastic tissues, J. Osaka Univ. Dent. School, 2 : 25-32, 1962.

5) Cohen, R.B., et al.: Histochemical demon-stration of esterase in malignant tumors,

Cancer Res., 11 : 709-711, 1951.

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Psoriasis, Dermatitis, Basaliom, spinozellula-ren Karzinom und Molluscum sebaseum, Dermat. Wchnshr., 134 : 1341-1349, 1956. 7) 田 中 他: 胃癌 の組 織化 学 的研 究, 第23回 日本 癌

学 会 総 会, S39.

8) Okamoto, Y., et al.: Histochemical study of aminopeptidase in neoplasms and infla-mmatory tissues, J. Osaka Univ. Dent. Sch-ool, 1 : 53-65, 1961.

9) Glenner, G.G., et al.: A study of aminope-ptidase activity in the stroma of neoplastic tisue with a comparison of histochemical techniques, J. Nat. Cancer Inst., 23 : 857— 873, 1959.

10) Monis, B., et al.: Study of leucine amino-peptidase in neoplastic and inflammatory tissues with a new histochemical method, Cancer, 12 : 601-608,1959.

11) Fishman, W.H., and Bigelow, D.R.: A co-mparative study of the morphology and glu-curonidase activity in 44 gastrointestinal ne-oplasms, J. Nat. Cancer Inst., 10 : 1115-1122, 1950.

12) Monis, B., et al.: 13-Glucuronidase activity in malignant neoplasms of man; A histochemi-cal study, Cancer, 13 : 386-393,1960. 13) Mori, M., et al.: Histochemical observations

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14) Monis, B., et al.: Histochemical study of 3 dehydrogenase systems in human tumors,

Cancer, 12 : 1238-1247, 1959.

15) 田 中他: 大腫 腫 瘍 の組 織 化 学 的 研 究, 第23回 日 本 癌 学 会 総 会, S39.

16) Pearse, A.E., Expansion of the limits of cel-lular pathology; The roll of enzyme histo-chemistry, J. Clin. Path., 11 : 520-534, 1958. 17) Mori, M., et al.: Histochemical study on

the localization of glucose-6-phosphate deh-ydrogenase in human tumors, Gann, 54 433

-442, 1963.

18) Mori, et al.: Histochemical studies on the localization of isocitric dehydrogenase in hu-man tumors, Gann, 55 : 117-123, 1964. (37)

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158 日本 消化 器 病 学 会雑 誌 第63巻 第2号 19) 堀 他: X線 と ミ トコ ン ド リ ア 酵 素 系, 最 新 医 学, 14: 572-578, S34. 20) 伊 藤, 滝 田: 放 射 線 照 射 唾 液 腺 のコ バ ク酸 脱 水 素 酵 素 に 関 す る 組 織 化 学 的 研 究, 大 阪 大 学 歯 学 雑 誌, 6: 37-44, S36. 21) 波 多 野: 酵 素 に 及 ぼ す 放 射 線 の 影 響, 細 胞 化 学 シ ン ポ ジ ウ ム, 9: 21-38, 1959. Abstract

Five cases of esophageal carcinoma, two of esophageal leukoplakia and one of carcinoma of tongue were investigated enzyme-histochemically.

Enzymes studied in the study were alkaline phosphatase, acid phosphatase, ƒÀ-esterase, aminopeptidase and ƒÀ-glocuronidase as hydrolytic enzymes, and succinic dehydrogenase, lactic dehydrogenase, malic dehydrogenase, a-glycerophosphate dehydrogenase glutamic dehydrogenase, ƒÀhydroxybutyric dehydrogenase, glucose-6-phosphate dehydrogenase and isocitric dehydrogenase as oxidative enzymes.

The activity of alkaline phosphatase and aminopeptidase were negative in squamous cell carcinoma, but occasionally positive in stromal element, especially in that of infiltrating carcinoma.

Succinic dehydrogenase activity of normal esophageal epithelium was stronger in basal cell layer than in keratinized layer. Other NAD dependent enzymes of it showed a similar tendency. On the other hand the activity of NADP dependent glucose-6-phosphate dehydro-genase of it was stronger in keratinized layer than in basal cell layer.

Generally, these squamous cell carcinomas appeared weak enzyme activity, but glucose-6-phosphate dehydrogenase activity was rather stronger than other enzymes. Some infiltrat-ing marginal area and small cell nestle of carcinomas showed rather strong activities of suc-cinic, ƒÀ-hydoxybutyric and malic dehydrogenases, also pearl formation revealed moderate activity of glucose-6-phosphate dehydrogenase.

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