酵母による油脂合成（第3報）

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酵母による油脂合成（第3報）

Rhodotorula glutinisの油脂合成に与える無機塩およびビタミンの影響

理学科研究室我謝孟俊

（昭和47年11月2日受理）

晃）（21、瀦は醐（Rh。d・…ul・gl・ti・i・）の脂質合 Ni…i・ic acid 5・・mg 成について，各種の窒素源を用いて，培養液11あたり ρ一Am三nobenzoic acid O．3mg

0．1〜2．09の窒素濃度における酵母の増殖の模様や Pyridoxine 1・Omg 菌体油脂含量および油脂収量に関する知見を報告した。 Ca−4−pantothenate 1．Omg すなわち酵母の油脂合成が培養液中の窒素源の種類や濃 Inosito1 75． Omg 度によって影響されることを明らかにした。 4−Biotin O・02mg

Rhodotorula属酵母の発育に対する各種の窒素源や炭を添加し，500m1振麗フラスコに100ml分注・105°C

素源の資化性，あるいはビタミンの影響などについてはで5分間殺菌したものを用いた。

よく調べられているカチ1）（4）油脂合成に与えるこれらの影培養方法は，まず基本培地で48時間（28°C）前培養響についてはそれほど詳しく研究されていないようであ（振盈培養）した菌体を，殺菌水で2回無菌的に洗浄し

る。そこで著者は，Rhodotourula属酵母の油脂合成の殺菌水に懸濁し・その1ml（乾燥菌体重量5・9mg）を

研究に常用してきている培地の無機成分やビタミンが・接種し，28°Cで3日間振盈培養iした。

油脂合成や油脂収量にどのように影響するのか予備的実〔皿〕測定法（1）

験をおこなったので，その結果を報告する。乾燥菌体重量および菌体油脂含量の測定は前報同様で

ある。

〔実験方法〕

〔実験結果および考察〕

〔1〕菌株

本実験に使用した菌株は長尾研究所より分譲してもら〔1〕油脂合成に対する硫酸第二鉄アンモニウム，硫酸った当研究室保存のRhodotorula 91utinisである。銅および硫酸亜鉛添加の影響

〔∬〕培地および培養方法基本培地および基本培地にそれぞれ硫酸第二鉄アンモ本実験に使用した培地は・Rhodotorula属酵母の油脂ニウム，硫酸銅，および硫酸亜鉛を添加することによっ

合成の研究に常用してきた純合成培地で・その組成は次て，菌体の生成，菌体の油脂含量がどのように影響され

の通りである。すなわち，蒸留水11中にglucose 50g，るかをみた結果が第1表である。基本培地で培養した場

Urea O．59， K、SO、49， Na2HPO4・12H2049， MgSO4・合と基本培地にそれぞれ無機成分を添加して培養した場 7H200．59， CaCl、．2H，00．19を溶解したものを基本合の菌体生成量，菌体油脂含量および油脂収量について培地（pH 4．5）とし，無機成分およびビタミン類は上記比較してみると・無機成分を添加して培養した場合の方

基本培地にそれぞれがよい結果を与えている。すなわち菌体生成量について

硫酸第二鉄アンモニウムは，基本培地で培養した場合よりも無機成分を添加して

（Fe2（SO4）3（NH4），SO、・24H、0） 0．02g 培養した場合の方が約1。3〜1．7倍量の菌体を生成してお硫酸銅（CuSO、・5H，0） 0．01mg り，菌体油脂含量についても約2．3〜2．4倍量の油脂を蓄

硫酸亜鉛（ZnSO、・7H20） 0．2mg 積していることになる。とくに無機塩の添加は，菌体の

Thiamine hydrochloride O．4mg 生成に対するよりも，油脂の蓄積に対する効果の方がむ

Riboflavin O．2mg しろ大きく，とくに硫酸亜鉛の油脂蓄積に対する影響は

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顕著である。第1表基本培地に無機塩を添加した場合の菌体生成および油脂合成に

基本培地に添加した硫酸第二鉄アンモ与える影響

ニウムの量はわずかであるが（0．02g／1），

Aンモニウム塩の1種として考えれば，

菌体生成量

i乾燥菌体重量）（ms／100nze）

菌体油脂生成量（含量）（％）

油脂収量ｫ／100ηの

窒素源として資化されることも考えられ

基本培地（S） 314

24．80 77．9

るので菌体の生成量が増加することも当 S十硫酸第二鉄アγモニウム

551

56．14 298．1 然なのかも知れない。硫酸銅，硫酸亜鉛

S十硫酸銅 473

56．71 268．2

については，RhodotQrula glutinisの

S十硫酸亜鉛 404 60．59

244．8 生育にとって必須な成分なのかどうか，

さらにくわしく検討する必要があろう。また油脂蓄積に Ca−4−pantothenateの影響が大きく，とくにriboflavin

対する硫酸銅および硫酸亜鉛の効果も脂質の生合成の上の影響が著しい。なお，菌体生威に与える4−biotin から興味がもたれる。の影響は，その添加量が少ないせいか，ほとんどみら

〔豆〕菌体生成および油脂合成に対するビタミンの影響れず，基本培地で得られた菌体生成量とほり同じ生成量

基本培地および基本培地にthiamine hydrochloride，であった。このことは本実験に使用したRhodotorula riboflavin， nicotinic acid，ρ一aminobenzoic acid， pyri− glutinisにとって 4−biotin はgrowth factorとし

doxine， Ca−4−pantothenate， inositolおよび4−bioti11 て作用しないのか，あるいは添加量が少ないために

を前述のような量を添加することによって菌体の生成お growth factorとしての効果がないのか，培地組成と

よび菌体の油脂含量がどのように影響されるのか，3日してのd−biotinの量を検討する必要があろう。

間振盈培養した結果を第1図および第2図に示した。菌体油脂含量に対しては，riboflavin， thiamine hy一

基本培地および基本培地にビタミンを添加した培地で培 drochloride， nicotinic acid， Ca−4・pantothenateの影響

養した場合の菌体生成量を比較してみると，添加したビがよく，とくにriboflavinの影…響がもっともよく，

タミンは4biotin を除いてはいずれも菌体の生成に thiamine hydrochlorideもdboflavin 程度の効果を

は効果的で，なかでもriboflavin， pyridoxineおよびもたらしている。

基本培地 Th巳aml ne hydrochlorlde R巳bofIavm

NIcotImc ac」d

ρ一AmmobenzO I c aOId

Pyrid・x川 1

Ca−6−panto電hena霊e

亙nOS1101

己一BlothIn

0 100 200 500 400 500

菌体生成量（吻〆10昭）㎡

第1図菌体生成に与えるビタミンの影響

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我謝：酵母による油脂合成（第3報） ¹⁵¹

基本培地 Th聖amne

hydrochlor竃de

R畳bofla層in

Nicotm累C

acld ρ一Aminobenzoic

aCId

PyndOXin

a−4−pant。匙henat

InOSItoI・

4−Blothin

0 10 20 50 40 50 60

菌体油脂含量（％）

第2図油脂合成に与えるビタミンの影響

〔皿〕油脂収量に対する無機塩およびビタミンの影響脂収量に与える影響は顕著で・基本培地で培養した場合

〔1〕および〔五〕で菌体生成量と油脂合成に与えるの油脂収量にくらべて約3〜4倍の収量をうることがで

無機塩およびビタミン添加の影響について考察してきたき，これは基本培地で培養した場合よりも，無機塩を添が，これらの結果から，油脂収量に対する無機塩，ビタ加した場合の方が，菌体生成量および菌体油脂含量が高

ミン投与の効果をまとめてみると第3図のようになる。いので当然の結果といえる。

硫酸第二鉄アンモニウム，硫酸銅および硫酸亜鉛の油また油脂収量におよぼすビタミン添加の効果はribo一

〒

基本培地 Fe2（SO4）3（NH4）2

SO424H20

〔CuSO4・5H20〕

〔ZnSO4・7H20〕

Th置amme

?凾р窒盾モ?hor■de ¹

1

RlbofIavm

1

NicotmiC

≠モ奄 1

ρ一A出mobenzOlc

1 ac■d

1

Pyndoxln i

a一己一pantothenat

InOS置tol

4−B巳olhm

0 50 100 150 200 250

500 油脂収量（㎎／100me）

第3図油脂収量に対する無機塩およびビタミンの影響

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flavin， Ca−4−pantothenate， pyridoxineおよびthiam一りもむしろ油脂合成に対して効果的で，なかでも，硫酸

ine hydrochlorideが良好で，なかでもriboflavinの亜鉛の効果が最も大きかった。菌体の生成に対しては硫

効果が顕著であった・Riboflavinの添加は菌体の生成酸第二鉄アンモニウムの添加が効果的であった。

のみならず菌体の油脂合成に対する影響がビタミン中で（2）基本培地にビタミンを添加した場合も，菌体生成お最も効果的であることから，多量の油脂収量を得る結果よび油脂合成に対して効果的で，菌体生成に対するより

となった。も油脂合成に対して，より効果的なことは無機塩添加の以上のように，菌体生成および油脂合成に対する無機場合と同じである。とくにriboflavinは，菌体生成お

塩，ビタミン添加の効果は確かに認められ，これらの影よび油脂合成に対しても最も効果的であった。

響は，菌体の生成に対する影響よりもむしろ菌体の油脂（3）無機塩およびビタミンの添加が，菌体生成，油脂合

合成に対する影響の方が大きいようである。成に効果的であることから，油脂収量が高くなり，基本

培地の場合にくらべて1．7〜38倍の収量をあげることが

〔要約〕できた。とくに硫酸第二鉄アンモニウムと・ib・flavin

の影響が顕著であった。以上のように酵母の油脂合成の研究に常用してきた純

合成培地組成のうち，91ucose， urea， K2SO4， Na2HPO4

・12H20， MgSO4・7H20， CaC12・2H20を含む培地を

文献基本培地とし，この基本培地に硫酸第二鉄アンモニウム

硫酸銅，硫酸亜鉛などの無機塩およびビタミンをそれぞ

れ添加することによって，Rhodotorula glutinisの菌（1）我謝孟俊：本紀要塑175（1970）

体生成，油脂合成，油脂収量がどのように影響されるか（2）我謝孟俊：本紀要挺149（1971）

考察してきたが，その結果を要約するとつぎのようにな（3）THASEGAWA and I°BANNO：工Gen APPI

る。 MicrobioL皇（3）279（1963）

（1）基本培地に無機塩を添加した場合，菌体生成および（4）丁且ASEGAWA：An臨ReP Inst Fe「mentatio馬

Osaka No．2，1（1965）油脂合成に対しても効果的で，菌体生成に対する影響よ

Fat Synthesis by Yeast Cells（Part 3）

Effect of Inorganic Compounds and Vitamins on the 」

eat Synthesis of Rhodotorula glutinis

Some Preliminary Experiments

Taketoshi GASHA

Ab8tr8ct

The effect of addition of inorganic compounds（ferric ammonium sulfate， copper sulfate

and zinc sulfate）and vitamins（thiamin hydrochloride， riboflav量n， nicotinic acid，♪aminobenzoic

acid， pyridoxine， Ca−4−pantothenate， inositol and 4・biotin） on growth and fat synthesis of

Rhodotorula glutin三s were investigated as the preliminary experiments． The growth and fat

formation of this strain were markedly increased by addition of inorganic compounds and

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