リアルタイム PCR 試薬
GeneAce qPCR Mix αシリーズ
＊希望納入価格に消費税は含まれておりません。
本シリーズは、リアルタイム PCR 用サーマルサイクラーに対応したリアルタイム PCR 用マスターミックス（ 2× 濃度） です。本シリーズは、化学的な修飾が施されたホットスタート PCR 用耐熱性ポリメラーゼ「Hot-Start Gene Taq NT」 と 最適化されたバッファーにより、非特異的増幅を抑制し、高い特異性と高い感度により広範囲の鋳型濃度に対し精度の 高い分析ができます。
特 長
・ 幅広いダイナミックレンジと高い定量精度を実現
・ 非特異的増幅を抑え、高い特異性と高感度の PCR を実現
・ 化学修飾によるホットスタート法で、調製時の酵素活性を極力抑制
・ プレミックスタイプの試薬が小分け分注済み
・ 増幅鎖長（600 bp 以下）に対する PCR 増幅効率が向上（SYBR® Green I 検出系）
特 長
・ 幅広いダイナミックレンジと高い定量精度を実現
・ 非特異的増幅を抑え、高い特異性と高感度の PCR を実現
・ 化学修飾によるホットスタート法で、調製時の酵素活性を極力抑制
・ プレミックスタイプの試薬が小分け分注済み
・ 増幅鎖長（600 bp 以下）に対する PCR 増幅効率が向上（SYBR® Green I 検出系）
＊包装単位は50 μl反応系での使用回数です。
注意
・本品は化学修飾を施したホットスタート PCR 酵素を採用しているため、酵素の活性化ステップ ( 95℃ 10 分 ) を条件通り行わ ないと十分な酵素活性が得られず増幅効率が低下します。
・リアルタイム PCR 用サーマルサイクラーでのランモード「Fast」の標準プロトコール [ 95℃ 20 秒 →(95℃ 3 秒 → 60℃ 30 秒 )× サイクル ] に対応しておりません。
・本品に dUTP が含まれていないため、Uracil-N-Glycosylase によるキャリーオーバー処理はできません。
本シリーズは、リアルタイム PCR 用サーマルサイクラーに対応したリアルタイム PCR 用マスターミックス（ 2× 濃度） です。本シリーズは、化学的な修飾が施されたホットスタート PCR 用耐熱性ポリメラーゼ「Hot-Start Gene Taq NT」 と 最適化されたバッファーにより、非特異的増幅を抑制し、高い特異性と高い感度により広範囲の鋳型濃度に対し精度の 高い分析ができます。
GeneAce qPCR Mix αシリーズ
SYBR® Green I 検出系
蛍光標識プローブ検出系
製品名 Code No. 包装単位 希望納入価格
GeneAce SYBR® qPCR Mix α
GeneAce SYBR® qPCR Mix α Low ROX
GeneAce SYBR® qPCR Mix α No ROX
319-07683
313-07681
316-07693
310-07691
319-07703
313-07701
300 反応用
60 反応用
300 反応用
60 反応用
300 反応用
60 反応用
￥36,000
￥12,000
￥36,000
￥12,000
￥36,000
￥12,000
製品名 Code No. 包装単位 希望納入価格
GeneAce Probe qPCR Mix α
GeneAce Probe qPCR Mix α Low ROX
GeneAce Probe qPCR Mix α No ROX
319-07823
315-07803
312-07813
300 反応用
300 反応用
300 反応用
￥36,000
￥36,000
￥36,000
Q&A
Q1. 機種によって対応試薬が異なるのはなぜですか？
A1. 装置に ROX による試薬の分注誤差を補正する機能が有るか無いかで、対応する試薬が異なります。 下記の「対応機種一覧」をご参照ください。
Q2. 使用期限は？
A2. −20℃保存で製造後 2 年間を使用期限とし、4℃保存の場合は約１ヶ月間の保存が可能です。
Q3. 凍結融解による活性への影響はありますか？
A3. 凍結融解による活性への影響は認められておりません。弊社では 40 回凍結融解を繰り返しても、 活性の低下は確認されませんでした。
Q4. 増幅の立ち上がりが遅い。
A4. 本品は化学修飾を施したホットスタート PCR 酵素を用いています。
そのため、酵素の活性化ステップ ( 95℃ 10 分 ) を条件通り行わないと十分な酵素活性が得られず 増幅効率が低下します。
対応機種一覧
機種 ABI GeneAmp® 5700, ABI Prism® 7000, 7700, 7900HT, ABI 7300, StepOne™/StepOnePlus™, Mastercycler® ep realplex
GeneAce SYBR® qPCR Mix α
Hot-Start Gene Taq NT, ROX Passive Reference,
Mg2+, dNTP Mixture, SYBR® Green I, stabilizer
GeneAce Probe qPCR Mix α
Hot-Start Gene Taq NT, ROX Passive Reference,
Mg2+, dNTP Mixture, stabilizer
機種 ABI 7500, Mx3000P, 3005, 4000, QuantStudio® 3, 5, 7
GeneAce SYBR® qPCR Mix α Low ROX
Hot-Start Gene Taq NT, ROX Passive Reference,
Mg2+, dNTP Mixture, SYBR® Green I, stabilizer
GeneAce Probe qPCR Mix α Low ROX
Hot-Start Gene Taq NT, ROX Passive Reference,
Mg2+, dNTP Mixture, stabilizer
機種 LightCycler®96, LightCycler®480, RotorGene Q, 6000, 2000, 3000, Thermal Cycler Dice®, Smartcycler®, CFX96, iCycler iQ®, iQ5, MyiQ®, DNA Engine Opticon®1 and 2, Chromo 4, Mini Opticon® , Quantica®
GeneAce SYBR® qPCR Mix α No ROX
Hot-Start Gene Taq NT,
Mg2+, dNTP Mixture, SYBR® Green I, stabilizer
GeneAce Probe qPCR Mix α No ROX
Hot-Start Gene Taq NT,
Mg2+, dNTP Mixture, stabilizer
・本製品は、試薬（試験研究用）として販売しているものです。医薬品の用途には使用しないでください。
（表では包装単位 300 反応用の製品内容を記載しています） SYBR® Green Ⅰ 検出用 蛍光標識プローブ検出用
[License] SYBR® Green I
For Licensee Products sold in the Research Field:
This product is provided under an intellectual property license from Life Technologies Corporation. The transfer of this product is conditioned on the buyer using the purchased product solely in research conducted by the buyer, excluding contract research or any fee for service research, and the buyer must not (1) use this product or its components for (a) diagnostic, therapeutic or prophylactic purposes; (b) testing, analysis or screening services, or information in return for compensation on a per-test basis; or (c) manufacturing or quality assurance or quality control, and/or (2) sell or transfer this product or its components for resale, whether or not resold for use in research. For information on purchasing a license to this product for purposes other than as described above, contact Life Technologies Corporation, 5781 Van Allen Way, Carlsbad, CA 92008 USA or [email protected].
2×GeneAce SYBR® qPCR Mix α 1.5 ml×5 本
2×GeneAce SYBR® qPCR Mix α Low ROX 1.5 ml×5 本
2×GeneAce SYBR® qPCR Mix α No ROX 1.5 ml×5 本
2×GeneAce qPCR Mix α 1.5 ml×5 本
2×GeneAce qPCR Mix α Low ROX 1.5 ml×5 本
2×GeneAce qPCR Mix α No ROX 1.5 ml×5 本
http://www.nippongene.com/
本 社 〒540-8605 大阪市中央区道修町三丁目1番2号 TEL：06-6203-3741 (代表) 東京本店 〒103-0023 東京都中央区日本橋本町二丁目4番1号 TEL：03-3270-8571 (代表)
フ リ ー ダ イ ヤ ル 0120-052-099 フリーファックス 0120-052-806
〒930‐0834 富山市問屋町二丁目7番18号
TEL： 076‐451‐6548 FAX： 076‐451‐6547
実験例 . SYBR® Green Ⅰ 検出系
プラスミド pUC19 DNA を鋳型として、本品の推奨 PCR サイクル条件 [ 95℃ 10 分→（95℃ 30 秒→ 60℃ 60 秒）×45 サイクル ] にて増幅鎖長 120 bp のリアルタイム PCR を行い、他社製品と増幅効率を比較した。また、融解曲線を描い て非特異的産物の有無を確認した。
比較 １：ABI7500
装 置 ： ABI 7500Run mode： 9600 emulation mode
試 薬 ： GeneAce SYBR® qPCR Mix α Low ROX（Code No. 316-07693）、A 社製品、B 社製品 鋳型 DNA ： NTC, 1 fg , 10 fg , 100 fg
反応液量 ：25 µｌ テスト数 ：n=3
赤 色 ：GeneAce SYBR®α
水 色 ：A社製品
緑 色 ：B社製品
20 25 30 35 40 45
NTC 1 fg 10 fg 100 fg
C
t
値
鋳型DNA量 増幅鎖長120 bp の場合
ほぼ同等 のCt 値
NTC
の増幅
A社製品 B社製品
非特異的
増幅産物 非特異的増幅産物
比較 ２：LightCycler® 96
装置： LightCycler
®
96 Ramp rate : 4.4 ℃/sec.試薬： GeneAce SYBR® qPCR Mix α No ROX（Code No. 319-07703）、C 社製品
鋳型 DNA 量： NTC, 0.1fg, 1 fg, 10 fg, 100 fg, 1 pg 反応液量： 25 µl テスト数： n=3
GeneAceSYBR®α
C社製品
GeneAceSYBR®α C社製品
非特異的 増幅産物
GeneAce SYBR® qPCR Mix α シリーズは、鋳型 DNA 量が少ない場合でもバラツキが少なく、低い Ct 値を示した。 GeneAce SYBR® qPCR Mix α シリーズにおける融解曲線解析では、それぞれの鋳型 DNA 量の増幅産物で同じ Tm 値の 1 本のピークが得られ、高い特異性が示された。
増幅鎖長 380 bp、600 bp の増幅においても同様の結果が得られた。 ⇒ニッポンジーンの Web ページにデータ掲載 GeneAce SYBR®α
A社製品、B社製品との比較
結果
C社製品との比較
赤色：GeneAce SYBR®α 水色：A社製品
緑色： B社製品
GeneAce qPCR Mix αシリーズ
プラスミドの希釈系列（NTC, 20, 125, 1.5 k, 20 k, 250 k Copies）を鋳型として、各種蛍光標識プローブを用いて本品の 推奨 PCR サイクル条件 [95 ℃ 10 分 → （95 ℃ 30 秒 → 60 ℃ 60 秒）× 45 サイクル ] にてリアルタイム PCR を行い、 他社製品と増幅効率を比較した。
実験例 . 蛍光標識プローブ検出系
比較 1：
5 FAM ‒ 3 TAMRA 修飾プローブ
GeneAce Probe qPCR Mix α Low ROX は、他社製品と比較して最も早い立ち上がりを示した。
検量線の比較では、GeneAce Probe qPCR Mix α Low ROX の Ct 値のばらつきが少なく、他社と比較してほぼ同じ傾きを 示した。
比較 2：
5 FAM ‒ 3 MGB 修飾プローブ
装 置 ： ABI 7500Run mode： 9600 emulation mode
試 薬 ： GeneAce Probe qPCR Mix α Low ROX （Code No. 315-07803）
A 社製品、B 社製品、D 社製品 鋳型 DNA：GM ダイズ（RRS）プラスミドセット 蛍光標識プローブ：RRS-Taq（FAM / TAMRA） 反応液量：25 μl
テスト数：n=3
装 置 ： ABI 7500
Run mode： 9600 emulation mode
試 薬 ： GeneAce Probe qPCR Mix α Low ROX （Code No.315-07803 ）
A 社製品、B 社製品、D 社製品
鋳型 DNA：GM コメ害虫抵抗性コメ検査用陽性コントロールプラスミド２
蛍光標識プローブ：KDEL-P(FAM/MGB) 反応液量：25 μl
テスト数：n=3
A社製品との比較
検量線の比較
赤色：GeneAce Probe α
青色：A社製品
緑色：B社製品
橙色：D社製品 赤色：GeneAce Probe α
青色：A社製品
赤色：GeneAce Probe α
緑色：B社製品
B社製品との比較
赤色：GeneAce Probe α
橙色：D社製品
D社製品との比較
検量線の比較 D社製品との比較 A社製品との比較
B社製品との比較
結果
赤色：GeneAce Probe α
青色：A社製品
緑色：B社製品
橙色：D社製品 赤色：GeneAce Probe α
青色：A社製品
赤色：GeneAce Probe α
緑色：B社製品
赤色：GeneAce Probe α
橙色：D社製品
